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          1. 超凈工作臺在細胞培養實驗中的應用


            植物(plant)組織具有無限增殖和產生不定芽、不定根的能力。凈化工作臺的原理:潔凈環境是在特定的空間內,潔凈空氣(進濾空氣)按設定的方向流動而形成的。以氣流方向來分,現有的超凈工作臺可分為垂直式,由內向外式以及側向式。在培養條件(tiáo jiàn)適宜時,只要通過一個超凈工作臺,以及用一個芽可以培養出許多植株來。其在保持優良砧木及品種種性、進行工廠化育苗方面具有很好的意義。
             
            超凈工作臺在細胞培養實驗中的應用方法步驟(procedure)如下:
             
               
              一、外植體接種與材料(Material)消毒(disinfection)
               取田間當年生新梢或一年生枝蔓,去葉,用肥皂水將表面(appearance)刷洗,并用自來水沖洗干凈,剪成一芽一段,放入干凈燒杯,拿進超凈工作(gōng zuò)臺;先用70%酒精過一下,無菌(fungus)水(用高壓鍋,在120℃下,滅菌30分鐘的水)沖洗3遍;再用0.1%升汞液消毒(disinfection)5~10分鐘,無菌水沖洗3遍;然后用酒精燈(Alcohol lamp)火焰消毒過的工具(鑷子、剪刀、撥針、解剖刀等)剝去鱗片、葉柄,取出帶數個葉原基的幼芽接入培養基,半包埋。
             
               培養基配好后裝入廣口的罐頭瓶、三角瓶或試管,裝入量為1~2厘米高。凈化工作臺用途:廣泛適用于醫藥衛生、生物制藥、食品、醫學科學實驗、光學、電子、無菌室實驗、無菌微生物檢驗、植物組培接種等需要局部潔凈無菌工作環境的科研和生產部門。也可連接成裝配生產線具有低噪聲、可移動性等優點。120℃滅菌(Sterilization)(fungus)30分鐘后備用。
             
               外植體接種后放到培養室的培養架上培養。培養條件(tiáo jiàn)為:光照1000勒克斯,8~10個小時,暗14~16小時;溫度(temperature)25~28℃。培養1~2周,即可看出是否消毒(disinfection)徹底,有無感染。及時巡查,將未感染的外植體轉接到新的培養瓶內,丟棄已感染的外植體。
             
               
              二、繼代繁殖
               上述接入的外植體培養1~2個月,即可長到2~3厘米長。在超凈工作(gōng zuò)臺上,將其剪成約1厘米長莖段,接種到新的培養基中(培養基的配方同上)。剪莖段時所用工具和培養皿(或牛皮紙)都要經過消毒,消毒方法分別同上述酒精(術語稱乙醇)燈消毒法和高壓消毒法。
             
               其后,大約每25天左右進行一次繼代培養。每次的莖段增殖量約為3~4倍。反復進行,直到所需數量。
             
               
              三、生根
               上述培養的莖段長到2厘米以上時,即可用于生根。生根培養基的成分為上述培養基的大量元素減半,除激素和蔗糖外,其他成分不變。
             
               生根培養基配好后也需高壓滅菌(120℃,30分鐘)后使用。
             
               生根培養20天左右,莖段上即可長出根,成為完整苗。生根苗長到3~5厘米長時即可鍛煉、移栽。
             
               
              四、生根苗的鍛煉、移栽
               (一)鍛煉
             
               組培苗在人工培養條件(tiáo jiàn)下長期生長,對自然生長環境(environment)的適應性減弱。超凈工作臺是為了適應現代化工業、光電產業、生物制藥以及科研試驗等*域對局部工作區域潔凈度的需求而設計的。移栽前需要一個過渡階段,即鍛煉。鍛煉方法(method)為:將培養瓶移**自然光照下2~3天,打開瓶口2~3天,再移栽。
             
               (二)移栽
             
               移栽時先洗凈根上培養基,避免(avoid)培養基感染雜菌(fungus)致苗死亡。移栽方法及灌水、遮陽等管理同實生苗移栽。但注意(attention)組培苗比較嬌嫩,需輕盈操作。
             
               
              五、工廠化育苗
             
            將上述培養基制備及超凈工作臺相關(related)、裝瓶、消毒(disinfection)、無菌(fungus)苗增殖、生根、鍛煉、移栽等過程全部放在實驗(experiment)室和溫室中進行,即為工廠化育苗。目前,這樣的生產線已在意大利和法G投入使用。但外植體接種尚需人工操作。
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